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哪些情況下,要對血清內毒素應格外留意篩選

更新時間:2022-05-12  |  點擊率:623

在細胞培養實驗中,血清無疑成為影響實驗成功與否的重要因素,而在眾多血清之中,牛血清是最為常用的。牛血清是細胞培養中用量最大的天然培養基,其中含有豐富的細胞生長所必須的營養成分,常用于動物細胞的體外培養,具有極為重要的功能。牛血清是一種成分復雜的混合物,而且血清的組成及含量通常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而存在差異。牛血清主要成分有蛋白質,多肽類,激素類,其他成分 如氨基酸、葡萄糖、微量元素等。

哪些情況下,要對血清內毒素應格外留意篩選

1.養干細胞時,干細胞對內毒素非常敏感,如果血清中內毒素≥3EU/ml時,干細胞很容易死亡。很多使用者,在血清在試用前,就通過提早審核該批次《檢測報告》,以決定是否入圍進行試用。

2.養免疫細胞時,過高的內毒素可誘導免疫細胞釋放炎癥因子,抑制小鼠紅細胞集落的形成等。

3.基因敲除相關的細胞實驗,培養的細胞要盡可能保持其原始狀態,任何引導細胞衰老或凋亡的試劑,都會讓后續的實驗結果“失之毫厘,謬以千里”。在準備血清和其他試劑時,選擇極低的內毒素(最好≤1EU/ml),對實驗至關重要;

4.原代培養、雜交瘤融合、細胞轉染,或者肝細胞、神經細胞、內皮等難養細胞的擴增,這些都需要挑選好的血清給細胞以有力支持。因此,挑選更低的內毒素,是保證實驗順利的第一步。

5.實驗室有些細胞,需要長期培養、長期凍存,或者經常復蘇、經常培養的,血清會經常或長時間作用于細胞。為保證細胞的健康,都應該選用更低內毒素的血清,以避免內毒素長久對細胞的毒性影響。

 

總之,血清中內毒素含量過高,更容易導致細胞“亞健康”,造成數據不準,或細胞狀態不良、老化、甚至死亡,導致試驗中斷失敗。血清中的內毒素越低越好。

細胞培養學會均依據內毒素對血清的品質進行分級和命名。

 

Ausbian®特級胎牛血清所有血清出廠前,均經過嚴格質控,每個批次附有詳細完整的《檢測報告》,包括:品名,貨號,批號,血源地,生產日期,保質期,pH值、滲透壓、血紅蛋白、總蛋白、球蛋白、IgG、內毒素、無菌檢查(細菌、真菌、支原體)、病毒檢查(如BVD、牛腺病毒、細胞病變效應等)、促細胞生長能力、細胞毒性、BVD-1/2抗體檢查等。

實驗人對于新批次血清,應認真審閱《檢測報告》,做好試用前篩選第一步。(如何看懂《檢測報告》,可登陸“締一生物”網站,留言技術部,得到免費幫助。)

 

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